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OET公司新增客户服务及最新技术

新品发布 2015-01-19 浏览:2988次

作为全球领先的杆状病毒表达体系供应商,OET公司向您隆重推荐我们客户服务以及最新技术,或许对您的工作有所帮助。

我们也很高兴地宣布,2007OET成立时的主创人之一,对杆状病毒表达载体系统有着30年经验的Robert Possee教授,最近加入了R&D科学家团队。

哺乳动物细胞表达
除了传统的杆状病毒表达系统,我们还能提供哺乳动物细胞重组蛋白表达服务。

摇袋式细胞培养生物反应器/规模化
我们新安装了GE公司的摇袋式细胞培养生物反应器,可用于昆虫细胞和哺乳动物细胞,进行1-50L规模重组蛋白表达。

高滴度BacMAMs
BacMAMs广泛用于哺乳动物细胞转染,可使用目标细胞特异启动子表达重组蛋白。由于不能进行复制,安全性好,BacMAMs可有望作为潜在的基因治疗 传送系统。重要的一点是当转染某些特定哺乳动物细胞时用到大量病毒,就要求高效的转导率。这些病毒需要先在昆虫细胞中生产,有时候还需要先浓缩一下才能用 到哺乳动物细胞中。

得到高滴度病毒是关键,我们最新研发产品BacMAMHT,由flashBAC稳定系统改造而成,该产品可使病毒滴度为传统BacMAM的五倍。使用 BacMAMHT载体可大幅度节省时间,费用成本。BacMAM的主要优势还是其高的转导率,可大大降低起始材料的用量。目前OET提供该高滴度 BacMAM的技术服务。OET将在2015年正式推出BacMAMHT试剂盒,该试剂盒将保留flashBAC构建重组病毒的所有优势,同时提高 BacMAM病毒滴度。

flashBAC系列变种及难表达蛋白
一些较难表达的蛋白如膜蛋白,分泌糖蛋白,尤其适合用flashBACGOLD flashBACULTRA系统,可有效提高这些蛋白在昆虫细胞中的表达量,该系统缺失了杆状病毒的几丁质酶(chitinase)和组织蛋白酶 cathepsincysteine protease)基因,将几丁质酶基因从病毒转染细胞中敲除,可清除重组蛋白从内质网转运中的障碍,组织蛋白酶基因的敲除则大大降低了重组蛋白的降解几率,从而提高蛋白产量。flashBACULTRA还有一个优势是其缺失了自身表达水平很高的杆状病毒p10基因。

用于多蛋白表达的载体上有两个p10启动子,所以flashBACULTRA缺失了p10启动子可以降低细胞中一些转录限制因素的竞争。

flashBAC系列和VLP生产
已有大量报道证明杆状病毒可以高效生产假病毒粒子(VLP)。VLP可作为病毒疫苗的潜在替代产品,或者用于研究病毒结构蛋白之间的互相作用。我们最近的客服中使用flashBAC系列产品生产了不同类型的VLPflashBACGOLDflashBACULTRA系统可提高VLP表达量并从细胞中高效释放。对于那些聚集在细胞内的VLP,用flashBACPRIME系统有助于后续纯化,该系统保留了几丁质酶,组织蛋白酶和P10 基因,这三个基因产物在转染后期促进细胞裂解,从而有助于VLP从细胞中释放到培养基中,已证实可提高VLP的纯度。

病毒拯救
杆状病毒表达系统用于重组蛋白的生产已有超过30年的历史,早期一些重组病毒低温冷藏作为标记样本,这些对现代研究非常有用,但是缺乏元数据记录。另外, 恶劣的储存条件会破坏病毒的感染能力,对于这样的病毒标本我们可以提供全定制服,我们一收到样本立即用空斑法分析其现有感染能力并在蛋白测试之前做扩繁, 对不确定的样本进行基因测序验证,我们还能鉴定是否有部分病毒失去了重组序列,如果有部分丢失重组序列,通过空斑纯化可以重新分离出纯合的重组病毒。

Bac-to-bacTMflashBAC:如您所需
重组杆状病毒的生产主要利用两个略不同的技术,两个系统都是首先将目的基因插入到转移载体上。Bac-to-bacTM系统是先体外生产重组病毒然后再转 染昆虫细胞;另一个系统是将转移载体和病毒DNA同时转染细胞,在细胞中重组产生重组病毒。OETflashBAC系统为后者,属于专利技术,一步法生 产重组病毒,转染后无需进行筛选,可简单,快速生产单个或多个重组病毒。如上所述,OETflashBAC系列产品可满足各种类型蛋白和VLP生产的需 求。

这两个系统使用不同的转移质粒,互相不兼容,因此很难尝试OETflashBAC来提高难表达蛋白的产量。我们研发生产了flashBAC系列病毒DNA,可以和现有的pFASTBacTM载体兼容,可用我们四个经过基因改造的flashBAC病毒载体检测您现有的转移载体,直接替换,无需重新构 建。

我们已对这些载体测试,现需求对此感兴趣的客户,免费尝试该系统,在新客服正式推出之前均免费。

 
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