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精品资讯 2015-03-19 浏览：2512次

尽管对于特定细胞种类的细胞分离步骤的优化，与细胞恢复的各种所需特性有关，但仍可以建立通用的优化指南。结合合理的实验设计方案，以下就细胞分离和酶的使用提出优化方案，以达到满意的细胞分离效果。

低细胞数量/低活性	过分离，细胞损伤。选择消化活性较低的酶，和/或降低工作弄过度。（例如，从使用胰酶更换到胶原酶，或从II型胶原酶更换到I型胶原酶）。
低细胞数量/高活性	分离不足。提高酶浓度和/或反应时间，观察细胞数量和活性的变化。如果细胞数量仍然不足，更换消化活性较高的酶和/或增加另一种酶。
高细胞数量/低活性	分离良好，细胞损伤。酶过消化和/或工作浓度过高。降低浓度和/或减少反应时间，并观察细胞数量和活性。尝试通过加入BSA（0.1-0.5% w/v）或大豆胰酶抑制剂（0.01-0.1% w/v）稀释水解反应来分离细胞。尝试减少水解酶用量，虽然这会降低细胞数量。
高细胞数量/高活性	最适实验条件！根据评估细胞分离参数的影响，考虑其他限制因素。

下图显示组织分离常用酶的相对消化活性。可以根据该图以及上面的表格优化实验方案。

更多信息欢迎访问Worthington网站，在《组织分离手册》中查询：