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细胞培养中支原体污染，切莫小视！
支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物（Table 1）。其环状双链DNA中富含腺嘌呤和胸腺嘧啶，细胞质中含有16S和23S核糖体RNA。支原体属于直径介于0.2-2µm的最小原核生物，形态易变，故极易通过滤膜而逃过培养液的过滤除菌步骤。又因其缺少细胞壁，所以对某些常用抗生素具有抗性。在细胞培养液中，支原体可达到107-108CFU/mL（CFU=Colony Forming Unit，是一种支原体的浓度测量单位）而不使培养液混浊及影响细胞生长。多种支原体对细胞不产生任何病变效应，使得细胞污染不易被察觉。
细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA, RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95％以上是以下四种支原体：口腔支原体（Mycoplasma orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（Acholeplasma laidlawii）。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
宝贵的细胞被支原体污染了怎么办？ 利器在手，高枕无忧！
De-Plasma™ 用于消除各类培养细胞中的支原体污染 ，也可用于预防培养细胞的支原体污染。De-Plasma™是大环内脂、喹诺酮、四环素化合物三种抗生素的混合物，与市场上其他同类产品相比，这3种成分的混合物几乎无细胞毒性，但是效价更高。能够有效的抑制所有已知的支原体种类和相关的无细胞壁原核生物。
De-Plasma™的每种抗生素的作用方式并不一样，四环素类和大环内酯类通过干扰在原核生物在核糖体上的转录而阻断蛋白的合成。喹诺酮类通过抑制细菌DNA旋转酶和拓扑异构酶IV阻断DNA的复制。由于真核生物无DNA旋转酶和拓扑异构酶IV，所以De-Plasma™不会对真核细胞产生影响。
目前去除支原体的商业化抗生素有以下几种：BM-Cyclin (Roche)含有一种大环内脂类和一种四环素类抗生素；Ciprobay（Bayer，只做处方药提供）和MRA (ICN) 均是喹诺酮类。然而，这3种商业化的支原体清除试剂都已超过15年，所以支原体已经对部分试剂产生了耐药性。
Table 2
|
产品 |
供应商 |
作用时间 |
便利性 |
有效性 |
细胞毒性 |
耐药性 |
|
BM-Cyclin |
Roche |
3周 |
- |
+++ |
+ |
+ / - |
|
Ciprobay |
Bayer |
12-20天 |
+ |
++ |
+ / - |
+ |
|
MRA |
ICN |
1-2周 |
+ |
++ |
+ / - |
+ |
|
De Plasma™ |
TOKU-E |
2-3周 |
- |
++++++ |
- |
- |
详细产品链接：
http://www.toku-e.com/product/DePlasma/
http://www.toku-e.com/Assets/Protocols/Protocol.pdf
PCR Mycoplasma Test Kit是为检测如细胞培养物等生物培养物中支原体污染而设计的。使用该方法可以在2小时内得到结果,通过PCR扩增和凝胶电泳而检测到支原体DNA特异条带。操作简单，灵敏度高，可作为细胞培养实验中的例行检测。
详细产品链接：http://www.toku-e.com/product/pcr_mycoplasma_detection_kit/
更多支原体抗生素请点击链接：http://www.toku-e.com/emMycoplasmaem-Detection-Elimination-C29.aspx
TOKU-E公司1981年成立于日本东京，由来自全球的顶尖专业人士组成，拥有世界领先的体外抗生素生产技术，并快速成长为世界领先的超纯抗生素供应者，以低廉的价格提供最全面的超纯抗生素，其纯度大于99%，用于动物细胞培养、植物组织培养、微生物、抗真菌及诊断等科研领域，允许研究者提高抗生素浓度，并消除污染，降低对细胞的伤害，从而提高筛选效率；该公司还提供精细化学试剂，如超纯丙烯酰胺、无尘SDS、胍盐等，极大提高了实验的精确性和安全性，可满足生命科学研究领域各科研机构，标准化组织机构的高标准需求。
北京四正柏生物—TOKU-E中国授权总代理，货期快速，欢迎咨询！
