相关介绍:
目前很多公司出售的抗体中通常会加入牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)作为稳定剂。然而,当需要进行抗体标记等实验时,抗体中添加的BSA会直接影响抗体的标记,大大降低偶联效果。因此,在进行抗体标记之前将BSA去除是十分必要的。
BSA去除试剂盒仅需要非常简单的步骤即可完成BSA的去除,操作便捷,快速。
保存条件:室温保存
有 效 期: 2年
试剂盒组份:
组份 |
APF005-001 |
APF005-005 |
BSA去除缓冲液 |
1.0ml |
5.0ml |
抗体清洗缓冲液 |
1.0ml |
5.0ml |
抗体保存缓冲液* |
1.0ml |
5.0ml |
注意事项:
1. 本试剂盒适合抗体浓度范围为0.03-10mg/ml,抗体浓度越高BSA去除效果越好。
2. 抗体中BSA可被有效去除的最高浓度为0.5%(5mg/ml),当BSA浓度大于0.5%时,建议用双蒸水或去离子水稀释样品,使BSA浓度≤0.5%。
3. 抗体中如果添加了甘油,甘油最高浓度为20%,如果甘油浓度大于20%,建议用双蒸水或去离子水稀释样品,使甘油浓度≤20%。甘油浓度越低BSA去除效果越好。
4. 抗体中不同缓冲液成份(如:MES,Tris,Na2CO3-NaHCO3和PBS)通常不会影响BSA去除效果。
5. 此试剂盒不能用于去除抗体中的明胶(gelatin)。
6. 此试剂盒不能用于从血清及培养上清中纯化抗体。
7. 抗体保存缓冲液中含有有毒成分叠氮化钠(NaN3), 操作时要带手套,使用时避免与皮肤,眼睛和黏膜接触。
使用说明:
1. 每100ul抗体中加入80ul BSA去除缓冲液.
2. 混匀后室温静置10min。
3. 抗体13,000g离心5min*, 直到管底有结实的沉淀形成。
*离心时间需根据抗体缓冲液的组份和抗体亚型的不同进行调整。
4. 移除上清至另一离心管中,待沉淀物经确定后再丢弃。
5. 按每100ul抗体的沉淀中加入80ul抗体清洗缓冲液的量重悬沉淀。
6. 抗体13,000g离心5min*, 直到管底有结实的沉淀形成。
*离心时间需根据抗体缓冲液的组份和抗体亚型的不同进行适当的调整。
7. 移除上清。
8. 取所需体积的抗体保存缓冲液(PBS,pH7.2-7.4,0.02%NaN3)重悬沉淀,也可根据后续实验要求使用其它适宜缓冲液重悬沉淀。
图1:SDS-PAGE显示抗体中BSA去除前后的对比。
抗体浓度1mg/ml, 抗体中BSA浓度0.1%(1mg/ml)。