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细胞因子（Cytokine）是由免疫细胞或者非免疫细胞合成和分泌的具有多种生物活性的低分子量可溶性的多肽和蛋白质，在免疫应答中发挥着重要的作用，如Th1细胞通过分泌IL-2、IFN-γ对抗细胞内细菌及原虫等抗原物质，Th2细胞通过分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-13等诱导和促进体液免疫应答，抵御细胞外抗原物质，Treg细胞通过分泌IL-10、TGF-β发挥免疫负调控作用。目前细胞因子检测有细胞生物学测定法、分子生物学测定法和免疫学测定法，今天我们就来重点聊一聊细胞因子免疫学测定的方法。 1. 酶联免疫吸附测定 酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, 简称ELISA）是检测细胞因子的最经典的方法，常用的是双抗体夹心法。它可以直接检测分泌到细胞外的处于游离状态的细胞因子，灵敏度高、操作简单、经济实惠，实验室配备一台酶标仪就可以完成整个实验。 2. 流式细胞术胞内染色法 细胞因子是由细胞合成和分泌的，ELISA只检测分泌到细胞外的细胞因子，新合成的细胞因子怎么检测呢？流式细胞术胞内染色法（Flow cytometry intracellular staining）便可以做到。通常情况下，获得需要的单细胞悬液后，经激活和通透处理之后，达到胞内染色检测细胞因子的浓度阈值，进行胞内细胞因子染色，最后可检测到合成细胞因子的阳性比例。和ELISA方法互为补充，一般只有在两种方法都得到阳性结果时，才能得出肯定的结论。 3. 细胞因子微球检测法 问题来了，如果同时对单个样本中多个指标进行检测，样本量又不够充分时，该用什么方法呢？那么，就选细胞因子微球检测技术（Cytometric Bead Array，CBA）。它是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，其基本原理和ELISA具有相似之处。受检系统里面包被有不同检测指标的荧光微球，每个微球上包被有不同的捕获抗体，并具有不同的荧光强度。捕获微球与待测样品溶液混合后，与相应抗原或蛋白结合，加入荧光检测抗体后形成“三明治”夹心复合物,通过流式细胞术便可对样品中的各检测因子的含量进行分析。
接下来，简单比较下三种常见检测方法：
北京四正柏生物科技有限公司（Beijing 4A Biotech Co, Ltd）创办于2009年，是一家集生物试剂研发、生产、销售和技术服务四位一体的高新技术企业，目前在北京亦庄开发区拥有研发中心，在苏州新区医疗器械园建设完成临床诊断转化中心。产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学、血液学等领域，涵盖单/多克隆抗体制备、纯化与标记、试剂盒开发与应用、细胞因子与流式抗体等方向。其中，ELISA试剂盒和流式抗体是我司优势产品，此外CBA试剂盒也正处于研发状态。 ELISA产品线 流式产品线（胞内染色相关） 参考文献： 1.Morgan E, Varro R, Sepulveda H, Ember JA, Apgar J, etal. Cytometric Bead Array: A Multiplexed Assay Platform with Applications inVarious Areas of Biology.Clinical immunology (Orlando, Fla.) 110, no. 3 (2004):252-66. 2. Costa OR, Verhaeghen K, Roels S, Stangé G, Ling Z,et al.An Analytical Comparison of Three Immunoassay Platforms for SubpicomolarDetection of Protein Biomarker Gad65. PloS one 13, no. 3 (2018): e0193670. 3.Maier R, Weger M, Haller-Schober EM, El-Shabrawi Y, Theisl A,et al.Application of Multiplex Cytometric Bead Array Technology for the Measurementof Angiogenic Factors in the Vitreous. Molecular vision 12, no. undefined(2006): 1143-7. 4.Ondigo BN, Park GS, Gose SO, Ho BM, Ochola LA,etal.Standardization and validation of a cytometric bead assay to assessantibodies to multiple Plasmodium falciparum recombinant antigens.Malar J. 2012 Dec 21;11:427. 更多促销活动： 细胞因子风暴检测试剂盒
