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正当同学们摩拳擦掌准备
在实验室用原代细胞做实验
一展身手的时候，
却在那一块块组织面前犯了难，
要怎么先制备成单细胞悬液呢？
网上说可以用机械解离的方法~
可是又担心细胞脆弱禁不住
酶消化法应用的很多哟，
但是这么多种类，怎么选嘛。。。。。
别急，让小柏来带你先认识一下常用的一些酶~
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Worthington酶产品相对消化能力图例
常见酶的消化能力从强到弱分别为：胰蛋白酶 > 木瓜蛋白酶 > 弹性蛋白酶 > 透明质酸酶 > 胶原酶Ⅱ > 胶原酶Ⅰ > 胶原酶Ⅳ > 中性蛋白酶（分散酶） > 胶原酶Ⅲ > 脱氧核糖核酸酶I。
在人、小鼠、大鼠、兔、羊以及猪等种属的组织分离中，均可在相关文献中看到以上这些酶的使用。
胶原酶（Collagenase）
由于细胞质基质含有大量的胶原蛋白，所以在大多数原代细胞分离中会应用到胶原酶去降解达到分离细胞的效果。最常使用的是胶原酶有四种类型，以下表格总结的是不同胶原酶常见的应用，当然也可根据文献或者实际的操作进行选择。
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木瓜蛋白酶（Papain）
木瓜蛋白酶具有广泛的特异性，与胰蛋白酶相比，能更广泛地降解大多数蛋白质底物，同时还表现出酯酶活性。木瓜蛋白酶比其他蛋白酶更加地温和，对细胞的破坏更小。使用木瓜蛋白试剂盒可温和地分离中枢神经系统（CNS）组织，相比于常用的胰蛋白酶消化方法获得的细胞产量更高、活性更好。
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其他
☆ 胰蛋白酶（Trypsin）: 一种胰丝氨酸蛋白酶，是已知的高度特异的蛋白酶之一。胰蛋白酶的消化能力相对较强，常用于组织的分离和细胞培养时的贴壁消化。
☆ 弹性蛋白酶（Elastase）：弹性蛋白在结缔组织的弹性纤维中含量最高，弹性蛋白酶常用于分离含有广泛的细胞间纤维网络的组织。弹性蛋白酶是分离Ⅱ型肺细胞的酶。
☆中性蛋白酶/分散酶（Neutral Protease /Dispase）：对细胞膜的作用是温和的，其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于分离原代和二次(传代)细胞培养。
☆ 透明质酸酶（Hyaluronidase）：可水解透明质酸和硫酸软骨素A和C，这些物质在几乎所有结缔组织的基质中都有高浓度存在。
☆ 脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DeoxyribonucleaseⅠ）：原代细胞分离过程中，有时会加入脱氧核糖核酸酶Ⅰ以消化受损细胞泄露到外界的DNA，从而降低粘度，并去除膜结合的DNA片段。此外，还可减少细胞聚集，提高用于流式的细胞样本质量。
目前组织的消化并没有固定的方法，更多的是基于过去的经验与参考文献。Worthington公司根据组织的类型（如下表）整理了历史以来的参考文献，我们可以根据不同的组织类型，种属，所需要分离的细胞类型，参考文献，选择合适于自己实验的酶产品。
http://www.worthington-biochem.com/tissuedissociation/default.html
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