细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。凋亡是多基因严格控制的过程。
根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。目前检测细胞凋亡的方法有许多种,以下是几种常用的方法:
(1)磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V /PI法)
磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS 可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V 是一种
碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将 Annexin-V 与 PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。
产品名称 |
规格 |
产品编号 |
品牌 |
Annexin Ⅴ-FITC/PI Kit / 凋亡检测试剂盒 |
20 Tests |
FXP018-020 |
4ABio (四正柏) |
Annexin Ⅴ-FITC/PI Kit / 凋亡检测试剂盒 |
50 Tests |
FXP018-050 |
4ABio (四正柏) |
Annexin Ⅴ-FITC/PI Kit / 凋亡检测试剂盒 |
100 Tests |
FXP018-100 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒 |
20 Tests |
FXP025-020 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒 |
50 Tests |
FXP025-050 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒 |
100 Tests |
FXP025-100 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒 |
20 Tests |
FXP022-020 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒 |
50 Tests |
FXP022-050 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒 |
100 Tests |
FXP022-100 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒 |
20 Tests |
FXP023-020 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒 |
50 Tests |
FXP023-050 |
4ABio (四正柏) |
AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒 |
100 Tests |
FXP023-100 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒 |
20 Tests |
FXP027-020 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒 |
50 Tests |
FXP027-050 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒 |
100 Tests |
FXP027-100 |
4ABio (四正柏) |
Annexin V Apoptosis Detection Set PE-Cy7 |
1 kit |
88-8103 |
eBioscience |
Annexin V Apoptosis Detection Kit APC |
1 kit |
88-8007 |
eBioscience |
Annexin V Apoptosis Detection Kit eFluor® 450 |
1 kit |
88-8006 |
eBioscience |
Annexin V Apoptosis Detection Kit FITC |
1 kit |
88-8005 |
eBioscience |
Annexin V PE Apoptosis Detection Kit PE |
1 kit |
88-8102 |
eBioscience |
Annexin V Apoptosis Detection Kit PerCP-eFluor® 710 |
1 kit |
88-8008 |
eBioscience |
APC Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD |
1 kit |
640930 |
Biolegend |
APC Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI |
1 kit |
640932 |
Biolegend |
FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD |
1 kit |
640922 |
Biolegend |
FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI |
1 kit |
640914 |
Biolegend |
Pacific Blue™ Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD |
1 kit |
640926 |
Biolegend |
Pacific Blue™ Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI |
1 kit |
640928 |
Biolegend |
如何选择以上试剂盒?
Annexin V FITC/PI 性价比最高,也是销量最好的凋亡试剂盒;
Annexin V Alexa Fluor488/PI与Annexin V FITC/PI在流式细胞仪上检测用相同的通道,但是Alexa Fluor488这种染料荧光强度和稳定性优于FITC,细胞分群更明显;
Annexin V-eGFP比Annexin V FITC更稳定,效期更长,可以-20℃保存。
Annexin V Alexa Fluor647/PI用于已转染GFP细胞的凋亡检测优势明显,而且无需调补偿,避免了人为因素的干扰。
(2)Tunel检测细胞凋亡(DNA片断原位标记法)
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。tunel是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。细胞凋亡检测其原理是荧光素标记的dUTP在末端脱氧核苷转移酶(TdT)的作用下,连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3-OH末端,利用由荧光显微镜或者流式细胞检测仪检测凋亡的发生。
产品名称 |
规格 |
产品编号 |
品牌 |
Apo-BrdU Apoptosis Detection |
1 Kit |
88-6671 |
ebioscience |
Apo-Direct Apoptosis Detection |
1 Kit |
88-6611 |
ebioscience |
Cell Meter™ TUNEL Apoptosis Assay Kit |
1 Kit |
22844 |
AAT |
【小结】:细胞发生凋亡时,膜上的PS外露早于DNA断裂发生,因此Annexin V联合PI染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏。又Annexin V联合PI染色不需固定细胞,可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA片段丢失。因此,Annexin V联合PI法更加省时,结果更为可靠,是目前最为理想的检测细胞凋亡的方法。